山羊β-酪蛋白基因调控区的克隆及启动子活性的检测

编号 zgly0000513982

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊β-酪蛋白基因调控区的克隆及启动子活性的检测

作者 郑艳玲  唐爽  张涌 

作者单位 西北农林科技大学生物工程研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2007,35(6)

页码 1-5

年份 2007 

分类号 Q785  Q786 

关键词 山羊  β-酪蛋白基因(CSN2)  调控区  PCR  GFP基因 

文摘内容 为了克隆山羊β-酪蛋白基因的调控区并检测5＇调控区的启动子活性,利用Long PCR技术对西农莎能奶山羊β-酪蛋白基因(CSN2)5＇和3＇调控区进行了克隆(5＇调控区分两段进行克隆,3＇调控区进行直接克隆)、测序,将克隆的5＇调控区的两个片段通过共有的单一性酶切位点HindⅢ融合成一个长为6.7 kb的片段,用其替代表达载体pEGFP-C1上原来的启动子CMV,指导报告基因绿色荧光蛋白(GFP)在山羊乳腺上皮细胞中的瞬时表达。结果表明,克隆的GC 3.3、GC 4.3、GC 6.6 3个片段与GenBank中登录的山羊CSN2基因相应序列相比,同源性均为99%,其包含了TATA box、GC island、CAAT box、SAR、AP1、Oct-1、Sm、Glyco、Pu-1、CAC等复合元件和转录翻译调节因子的作用位点,并且5＇调控区可以有效指导报告基因的表达,从而初步验证了所克隆的山羊CSN2基因5＇调控区的有效性,表明克隆的调控区可用于乳腺生物反应器的研究。