猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

编号 zgly0001715380

文献类型 期刊论文

文献题名 猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

作者 张慧  张安洁  张锋  尼博  刘爽  崔进  董雅琴  李晓成  魏荣 

作者单位 中国动物卫生与流行病学中心  云南农业大学动物医学院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年08期

年份 2020 

分类号 S858.28 

关键词 猪血凝性脑脊髓炎病毒  实时荧光RT-PCR  探针法 

文摘内容 为建立一种快速、准确、常规的猪血凝性脑脊髓炎病毒（porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV）检测方法,根据PHEV N蛋白基因序列,设计1对引物和1条探针,建立了PHEV实时荧光RT-PCR检测方法。该方法特异性好,与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒2型（PCV2）均无交叉反应;用阳性质粒Puc57-PHEVn评估其敏感性,发现检测下限达10-6 ng/μL（224拷贝/μL）。采集233份发病猪组织样品进行临床检测,发现该方法与巢式RT-PCR的符合率达98.3%,准确筛查出巢式RT-PCR并测序阳性的样品14份,且检出率高于巢式RT-PCR。结果表明,本方法敏感、特异,可用于PHEV临床样品的检测。