抗体夹心BGT—ELISA方法的建立及在转基因白桦中的应用

编号 zgly0000647130

文献类型 期刊论文

文献题名 抗体夹心BGT—ELISA方法的建立及在转基因白桦中的应用

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 曾凡锁  骆薇  赵宏翠  詹亚光  孙东 

作者单位 东北林业大学生命科学学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2010(1)

页码 67-73

年份 2010 

分类号 S718.3 

关键词 转基因白桦  多克隆抗体  酶标抗体  酶联免疫 

文摘内容 以蜘蛛杀虫肽与Bt—toxinC肽融合蛋白基因（bgt基因）的表达产物的定量分析为研究目标，采用原核表达及纯化出融合蛋白His—BGT作为抗原进行兔免疫，得到相应的抗血清，采用ELISA法检测效价在1：10000以上，并对抗血清进行了免疫亲和层析，获得了高纯度的IgG，Westernblot检测具有较好的特异性。采用过碘酸钠法将抗体标记辣根过氧化物酶（HRP），得到第二抗体即酶标抗体，标记率在85％以上。建立起检测BGT杀虫蛋白的快速、灵敏的方法。应用该检测方法，分析了不同转基因白桦（Betulaplatyphylla Suk．）株系中BGT蛋白含量占叶片可溶性总蛋白含量的0．05％～0．3％，并利用Westernblot验证了此方法是可靠的。说明抗体夹心BGT-ELISA方法能够定量分析转基因植株中BGT蛋白的含量，为转bgt基因植物的检测和应用奠定了基础。