一种适合稻水象甲双向电泳的蛋白质提取方法

编号 zgly0001513622

文献类型 期刊论文

文献题名 一种适合稻水象甲双向电泳的蛋白质提取方法

作者 杨爽  尹姣  张炬红  李克斌  席景会 

作者单位 吉林大学植物科学学院  中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 

母体文献 生物安全学报 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S435.112.6 

关键词 2-DE  蛋白提取  稻水象甲  TCA-丙酮  饱和酚 

文摘内容 【背景】蛋白样品制备是2-DE蛋白组学研究的关键步骤,无杂质、高纯度的蛋白样品是获得良好的2-DE结果的基础。选择合适于昆虫蛋白组学研究的常规蛋白提取方法是2-DE研究的前提。【方法】通过饱和酚法和TCA-丙酮法提取稻水象甲成虫总蛋白,比较2种方法的优缺点,以回避昆虫组织蛋白提取时可能出现的问题。【结果】TCA-丙酮法的蛋白质产率(14.55μg·mg-1)显著高于饱和酚法(9.30μg·mg-1),2种方法获得的SDS-PAGE条带结果相近,且高丰度表达蛋白在TCA-丙酮中更高表达;饱和酚的2-DE图谱蛋白点清晰,TCA-丙酮法2-DE图谱蛋白点规则但背景模糊,出现多条横纹。【结论与意义】饱和酚法适合稻水象甲成虫蛋白组学的研究。这2种方法也能适用于其他昆虫,但不同的昆虫体内有不同的干扰组分来干扰蛋白质的提取,所以获得的蛋白纯度及提取得率可能并不一样。试验结果说明了2种蛋白提取方法对2-DE研究的影响,并为稻水象甲成虫的蛋白组学研究提供了一定的参考依据。