割手密叶绿体DNA的高效提取方法

编号 zgly0001528802

文献类型 期刊论文

文献题名 割手密叶绿体DNA的高效提取方法

作者 田春艳  李富生  何丽莲  娄红波  杨清辉  肖关丽  胡海洋  唐荣平  王先宏 

作者单位 云南农业大学甘蔗研究所  云南临沧高等师范专科学校数理系 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 S566.1 

关键词 割手密  叶绿体DNA  高盐-低pH法  高效提取 

文摘内容 为了提取高质量的割手密叶绿体DNA(chloroplast DNA,cp DNA),本研究立足于高效、省时、低耗的原则,以割手密幼叶为材料,采用改进的高盐-低p H法经差速离心分离叶绿体、DNaseⅠ处理、10%SDS和蛋白酶K裂解叶绿体、DNA萃取、乙醇沉淀等一系列操作。所提取的割手密cp DNA经显微观察、紫外吸收光度测定、琼脂糖凝胶电泳、叶绿体基因特异引物PCR扩增等进行检测,结果表明该提取方法简单高效,A260/A280的比值介于1.9~2.0,cp DNA纯度高,浓度为2.90μg/μL,适用于基因扩增等分子操作。研究结果为进一步开展割手密叶绿体基因功能、系统发育、遗传多样性等方面的研究奠定了基础。