犬新孢子虫NcSRS2基因原核表达质粒的构建

编号 zgly0001340179

文献类型 期刊论文

文献题名 犬新孢子虫NcSRS2基因原核表达质粒的构建

作者 丁德  梁晚枫  田野  田万年  贾立军  张守发 

作者单位 延边大学农学院动物医学系  延边大学农学院动物医学系 吉林龙井133400  吉林龙井133400 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2008年02期

年份 2008 

分类号 S852.7 

关键词 犬新孢子虫  聚合酶链反应  NcSRS2基因  原核表达载体PGEM-4T-2 

文摘内容 根据已发表的犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计1对含有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点的引物。以提取犬新孢子虫虫体基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,将此基因片段克隆到pMD18-T Simple载体上,用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切该片段,回收得到含有两个酶切位点黏端的Nc-SRS2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的PGEM-4T-2原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-NcSRS2,经PCR鉴定,限制性内切酶分析和克隆片段序列测定比较,证实了重组质粒的正确性。