显示基因表达差异的PAGE-银染技术

编号 zgly0001211153

文献类型 期刊论文

文献题名 显示基因表达差异的PAGE-银染技术

作者 谭巍  李强  王勇  王淑芳  王宁宁 

作者单位 南开大学生命科学学院生化及分子生物学系!天津300071 

母体文献 植物生理学通讯 

年卷期 1999年06期

年份 1999 

分类号 Q503 

关键词 银染技术  PAGE  银染方法  基因表达差异  聚丙烯酸胺凝胶  缓冲液  大豆叶片  基因表达变化  结荚期  差异表达 

文摘内容 ｄｄＲＴ－ＰＣＲ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ　ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ－ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术是Ｌｉａｎｇ和Ｐａｎｄｅｅ［１］于１９９２年首先建立的一种在ＲＮＡ水平上显示基因表达差异，进而分离目的基因的有效方法。与其它分离基因的方法相比，ｄｄＲＴ－ＰＣＲ方法具有许多优点［２］，目前已经成为筛选未知差异表达基因的最为有效的方法之一。ｄｄＲＴ－ＰＣＲ是３种技术的有机结合：（１）通过错定引物Ｔ１２ＭＮ（Ｍ＝Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ，Ｎ＝Ａ、Ｃ、Ｇ），将ｍＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ；（２）选择性地使用武断引物（６～１３ｂｐ的随机引物）进行ＰＣＲ