柑橘黄化脉明病毒DTBIA检测方法的建立

编号 zgly0001493797

文献类型 期刊论文

文献题名 柑橘黄化脉明病毒DTBIA检测方法的建立

作者 宾羽  宋震  李中安  周常勇 

作者单位 西南大学柑桔研究所  中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2015年09期

年份 2015 

分类号 S436.66 

关键词 柑橘  柑橘黄化脉明病毒  直接组织点免疫法 

文摘内容 通过柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)兔源多克隆抗体(一抗)及Ap标记羊抗兔IgG(二抗)最佳稀释度等条件优化建立了CYVCV直接组织点免疫(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)检测方法,并对其特异性、稳定性和检测效果进行了评价。试验结果显示,一抗、二抗稀释比例分别为1︰8 000和1︰2 000时,DTBIA检测CYVCV效果最佳;应用所建立的DTBIA方法对携带9种不同柑橘病害的柑橘样品进行检测时,仅携带CYVCV样品呈阳性反应;柑橘黄脉病样品植物组织印迹后,印迹膜于4℃保存,90 d内可进行有效的CYVCV检测;对田间不同柑橘品种利用DTBIA法检测CYVCV,其结果与一步法RT-PCR符合率为97.92%。可见,该CYVCV检测方法快速、简便、稳定、特异及可靠,可推广应用于田间快速检测CYVCV,对于防范柑橘黄化脉明病毒大面积传播流行具有重要的现实意义。