利用RNA干扰介导抗病性获得兼抗四种病毒的转基因马铃薯

编号 zgly0001669361

文献类型 期刊论文

文献题名 利用RNA干扰介导抗病性获得兼抗四种病毒的转基因马铃薯

作者 齐恩芳  贾小霞  刘石  陈晓艳  文国宏  胡新元 

作者单位 甘肃省农业科学院马铃薯研究所  哈密市伊州区种业研究开发中心 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2019年01期

年份 2019 

分类号 S435.32 

关键词 马铃薯病毒  RNA干扰  转基因马铃薯  多病毒抗性 

文摘内容 为获得兼抗马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)和马铃薯潜隐花叶病毒(Potato virus S,PVS)4种病毒的转基因马铃薯新材料,分别以这4种病毒全长CP基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得4种病毒CP基因相对保守区段的基因片段,并将其拼接成融合基因,以载体pHANNIBAL和pBI121为基础,构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导的转基因体系进行马铃薯遗传转化,并对获得的转基因马铃薯进行病毒抗性检测。结果表明,所获得的融合基因片段RH1和RH2,酶切鉴定分别得到长度为1 200 bp的条带,与预期片段相符;构建了含pdk内含子和RH1、RH2融合基因的RNAi植物表达载体,经Bam H I/Sac I双酶切,获得长度约3 200 bp的片段,表明RNAi植物表达载体pBI121-pRH构建成功;转化易感病毒马铃薯品种陇薯11号,PCR检测和PCRSouthern杂交分析表明融合基因已整合到陇薯11号马铃薯基因组中;抗病性检测显示4株转基因马铃薯植株对4种病毒均免疫。表明利用RNAi可筛选出抗多种病毒的转基因马铃薯新种质。