表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

编号 zgly0001266672

文献类型 期刊论文

文献题名 表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

作者 李嘉琦  吴娟  孙茂盛  戴长柏 

作者单位 中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所  中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所 云南昆明650118  云南昆明650118  云南烟草科学研究院生物技术重点实验室  云南昆明650106  云南昆明650118 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2003年02期

年份 2003 

分类号 R373 

关键词 重组腺病毒  HAV结构基因  鉴定  细 

文摘内容 利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。