苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选

编号 zgly0000466989

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选

作者 张丽丽  师校欣  杜国强  冯莎莎  张俊阁 

作者单位 河北农业大学园艺学院 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2006,22(10)

页码 80-84

年份 2006 

分类号 S661 

关键词 苹果  基因转化  农杆菌  抗生素 

文摘内容 以苹果品种嘎拉试管苗为试材, 研究了卡那霉素(Km)、潮霉素(Hm)对继代苗生长和离体叶片再生的影响, 以确定叶盘法基因转化的选择压和转化体的筛选浓度: 同时研究了不同浓度的头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)对苹果离体叶片再生的影响及对农杆菌EHA105和LBA4404的抑菌效果: 以确定侵菌共培养后合适的抑菌抗生素种类和浓度。结果表明: Km10mg/L、Hm4.0mg/L完全抑制了叶片不定芽的分化, 可作为苹果叶盘法转化时抗性芽的选择压: Km50mg/L、Hm5.0mg/L达到继代苗的半致死浓度, 可作为转化后抗性苗的筛选浓度: 由于抗性芽再生的选择压与抗性苗筛选浓度相差较小。Hm相对于Km更适合作为苹果基因转化的选择标记: 培养基中附加Cef300mg/L能完全抑制农杆菌生长。对叶片不定芽的再生影响不大; 而附加Carb则需400mg/L以上才能抑制农杆菌生长, 同时严重抑制了叶片再生。因此, 宜选用Cef作为苹果基因转化的抑菌抗生素。