金花茶查尔酮合成酶基因CnCHS的克隆及遗传转化研究

编号 zgly0001497037

文献类型 期刊论文

文献题名 金花茶查尔酮合成酶基因CnCHS的克隆及遗传转化研究

作者 周兴文  李纪元  朱宇林 

作者单位 玉林师范学院生命科学与技术学院  中国林业科学研究院亚热带林业研究所 

母体文献 植物研究 

年卷期 2015年03期

年份 2015 

分类号 Q943.2 

关键词 金花茶  查尔酮合成酶  表达载体  转基因植株 

文摘内容 根据已发表的金花茶查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因(CnCHS)序列设计全长扩增引物,以金花茶花瓣总cDNA为模板进行PCR扩增,成功获得了该基因cDNA全长。将扩增所得全长产物连接PMD18-T载体后转化大肠杆菌E.coli DH5α,提取质粒后经酶切、测序鉴定后,将其与双元表达载体pCAMBIA1300连接,成功构建了CnCHS基因的正义表达载体pCAM-CnCHS。将该重组表达载体转化农杆菌EHA105后,利用农杆菌介导法将CnCHS基因转入烟草,获得转基因烟草18株。利用PCR法及Southern blotting对所获得的转基因植株进行鉴定,结果显示CnCHS基因成功整合到烟草基因组中,阳性率达67%,并获得了单拷贝转基因植株。这些结果表明本研究成功构建了金花茶CnCHS基因对烟草的遗传转化体系,为深入研究CnCHS基因的功能及其对花色的调控效应奠定了基础。