茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析

编号 zgly0001528235

文献类型 期刊论文

文献题名 茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析

作者 张芬  王丽鸳  成浩  韦康  胡娟  张成才  刘圆  吴立赟  李海琳 

作者单位 中国农业科学院茶叶研究所国家茶树改良中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2016年07期

年份 2016 

分类号 S571.1 

关键词 茶树  亚硝酸还原酶  克隆  基因表达  氮素 

文摘内容 以‘龙井43’茶树叶片的c DNA为模板,利用RT PCR技术克隆了茶树亚硝酸还原酶基因（CsNiR）,得到完整的ORF全长为1 764 bp,编码587个氨基酸;所推导的氨基酸序列与垂枝桦（Betula pendula）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）、菠菜（Spinacia oleracea）和水稻（Oryza sativa）的同源性均大于76%。生物信息学分析表明,CsNiR分子量为68.648 k D,等电点为6.12,为亲水性的非分泌蛋白;二级结构的预测显示,Cs Ni R具有完整的Ni R蛋白结构,含血红素蛋白β–化合物区域和4Fe-4S区域。实时荧光定量结果表明,该基因在成熟叶片中表达量高于一芽二叶和根。采用营养液水培3个茶树品种,在氮饥饿两周后分别供应正常氮素和低氮素(1和0.1 mmol·L-1 NH4NO3),q RT-PCR测定发现,正常氮素处理的2 h和6 h,诱导根CsNiR表达量显著增加,叶片中的表达量变化延迟到24 h之后,且变化幅度存在基因型之间的差异;低氮处理对CsNiR表达量的影响相对较小。因此,研究Cs Ni R基因的表达特性及其在茶树氮素利用中所发挥的作用,需结合茶树基因型、组织部位、供氮水平等进行综合评价。