杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探

编号 zgly0001456914

文献类型 期刊论文

文献题名 杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探

作者 李慧  李刚波  丛郁  常有宏  蔺经  盛宝龙 

作者单位 江苏省农业科学院园艺研究所  国家农业科技华东(江苏)创新中心——高效园艺作物遗传改良实验室  南京农业大学园艺学院  中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2013年08期

年份 2013 

分类号 S792.99 

关键词 杜梨  类钙调磷酸酶B亚基蛋白  基因克隆  基因表达特点  原核表达  逆境胁迫 

文摘内容 类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBLs)是植物中一类重要的钙离子传感器,参与调控植物生长发育及逆境胁迫响应过程。为了探明杜梨CBLs家族成员PbCBL2的序列特征和表达模式,以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试材,运用EST搜索结合RACE技术、染色体步移法对PbCBL2的cDNA、DNA和启动子进行克隆,采用半定量RT-PCR和原核表达研究该基因在非生物胁迫下的表达模式。结果表明,PbCBL2基因cDNA序列长681bp,编码一个含有226个氨基酸残基的蛋白。基因组DNA序列长1927bp,包括8个外显子和7个内含子,启动子序列包含光反应元件、厌氧诱导必需顺式作用元件、赤霉素反应元件和水杨酸响应顺式作用元件。PbCBL2编码的多肽具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中未检测到PbCBL2的表达,PbCBL2的表达受NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA诱导上调。PbCBL2转入大肠杆菌BL21(DE3)后,能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对该菌株的生长抑制。PbCBL2基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,大肠杆菌转入该基因后能够提高对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力。