条锈菌诱导的小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区的克隆及原核表达

编号 zgly0001330653

文献类型 期刊论文

文献题名 条锈菌诱导的小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区的克隆及原核表达

作者 刘博  崔素萍  王晓杰  黄丽丽  康振生 

作者单位 西北农林科技大学植保学院  陕西省农业分子生物学重点实验室  西北农林科技大学植保学院 陕西杨凌712100  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年06期

年份 2007 

分类号 S435.121 

关键词 条锈菌  小麦  β-1  3-葡聚糖酶基因  克隆  原核表达 

文摘内容 为研究小麦与条锈菌互作过程中β-1,3-葡聚糖酶基因的功能,根据小麦β-1,3-葡聚糖酶cDNA全长序列设计合成引物,通过RT-PCR方法获得小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区,将其克隆至pGEM T-easy Vector,经HindⅢ和BamHⅠ双酶切回收目的片断,并将其定向克隆到pET-32a(+)Vector中构建表达载体GLU-pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。结果表明,小麦β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中得到了高效表达,获得了分子量约为49 ku的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的19%。最佳诱导条件为:0.3 mmol/LIPTG,37℃诱导4 h。