百合叶片总RNA提取方法比较及优化

编号 zgly0000573915

文献类型 期刊论文

文献题名 百合叶片总RNA提取方法比较及优化

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 尹慧  陈莉  李晓艳  陈秋明  义鸣放 

作者单位 中国农业大学农学与生物技术学院 

母体文献 中国农业大学学报 

年卷期 2008,13(4)

页码 41-45

年份 2008 

分类号 S682.2 

关键词 百合  叶片  RNA提取  CTAB改进法  多糖  RT-PCR 

文摘内容 为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明：不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。