同安钮夜蛾核型多角体病毒Opdi108基因的分子克隆和细胞定位(英文)

编号 zgly0001433561

文献类型 期刊论文

文献题名 同安钮夜蛾核型多角体病毒Opdi108基因的分子克隆和细胞定位(英文)

作者 常润磊  刘莉  韦春梅  郎国俊  许雯  毛珊珊  林同 

作者单位 华南农业大学林学院  国家林业局桉树研究开发中心  浙江经贸职业技术学院应用工程系  浙江大学昆虫研究所 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S763.42 

关键词 同安钮夜蛾  核型多角体病毒  Bac-to-Bac表达系统  细胞定位  Opdi108 

文摘内容 【目的】同安钮夜蛾Ophiusa disjungens(鳞翅目,夜蛾科)是危害桉树的主要害虫之一。同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)是从O.disjungens中分离到的新病毒。本研究主要目的是从分子水平上了解该病毒。【方法】对一条PstⅠ的酶切片段进行了克隆、测序和分析。【结果】在基因数据库中通过对碱基序列的比对,发现了一个Ac108的同源基因,命名为Opdi108(GenBank登录号为EU732666)。该基因的开放阅读框含有225对碱基,其编码蛋白与其他已知杆状病毒同源物有16%～37%的氨基酸序列一致性。在起始密码子ATG上游有一个晚期启动子TAAG。C末端含有His-tag的Opdi108基因在大肠杆菌中Escherichiacoli进行了表达,融合蛋白的分子量为28.7kDa。以荧光蛋白EGFP为标记物,构建了Opdi108与EGFP的重组体,利用Bac-to-Bac表达系统实现了与AcMNPV的重组,用该重组病毒vEGFP-Opdi108感染斜纹夜蛾Trichoplusiani细胞。感染24和72h后分别用共聚荧光显微镜观察,发现Opdi108定位在细胞质内。【结论】本研究从分子生物学角度研究OpdiNPV,为进一步利用该病毒防治包括同安钮夜蛾在内的害虫,以及构建重组杀虫剂等奠定基础。