家蚕蜕皮激素受体基因EcR-A的启动子活性区域分析

编号 zgly0001468480

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕蜕皮激素受体基因EcR-A的启动子活性区域分析

作者 杜杰  黄明霞  刘云垒  赵国栋  卫正国  沈卫德 

作者单位 苏州大学基础医学与生物科学学院  现代丝绸国家工程实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S881.24  Q785 

关键词 家蚕  蜕皮激素受体  EcR-A基因  启动子活性  双荧光素酶报告系统  Bac-to-Bac表达系统 

文摘内容 昆虫蜕皮激素(20-羟基蜕皮酮)与蜕皮激素受体(EcR)和超气门蛋白(USP)相互作用启动蜕皮级联反应过程,由EcR和USP组成的复合物是蜕皮激素的作用靶标。为研究家蚕EcR-A基因(Bm EcR-A)的转录调控机制,利用双荧光素酶报告系统和Bac-to-Bac表达系统制备含5’端长度不同Bm EcR-A基因启动子片段的重组杆状病毒,分别将重组杆状病毒感染家蚕后检测启动子的活性。结果表明,在Bm EcR-A启动子的-637~-518 bp和-278~-177 bp区域存在正调控元件,并且能被0.002 g/L 20E诱导。通过构建含5’端长度不同Bm EcR-A启动子片段的荧光素酶报告质粒,在细胞水平上进一步分析Bm EcR-A启动子活性区域,结果显示:在-637~-612 bp和-278~-177 bp区域包含Bm EcR-A基因启动子转录调控必需的重要调控元件;当删除-197~-177 bp区域后,启动子活性明显增强,推测在该区域可能含有一个转录抑制因子结合位点。研究结果提示:上述启动子区域包含有转录调控元件的结合位点,是进一步研究Bm EcR-A启动子核心区域的重要线索。