CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

编号 zgly0001659551

文献类型 期刊论文

文献题名 CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

作者 邹修平  范迪  彭爱红  何永睿  许兰珍  雷天刚  姚利晓  李强  罗克明  陈善春 

作者单位 西南大学柑桔研究所  西南大学生命科学学院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2019年02期

年份 2019 

分类号 S666 

关键词 柑橘  CRISPR/Cas9系统  CsLOB1  多位点  基因编辑 

文摘内容 为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。