弓形虫HT分离株ROP5蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

编号 zgly0000549036

文献类型 期刊论文

文献题名 弓形虫HT分离株ROP5蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

作者 乔军  杨松涛  高玉伟  秦川  华育平  王立刚  刘丹  王玮  周明  夏成柱 

作者单位 吉林省军事医学科学院军事兽医研究所  甘肃省中国农业科学院兰州兽医研究所  中国医学科学院实验动物研究所  东北林业大学野生动物资源学院  黑龙江东北虎林园 

母体文献 热带医学杂志 

年卷期 2007,7(9)

页码 842-845

年份 2007 

分类号 R382.5 

关键词 弓形虫  分离株  ROP5基因 

文摘内容 目的克隆和表达弓形虫虎源分离株(HT株)ROP5蛋白基因。方法运用RT—PCR技术从弓形虫HT株中扩增出ROP5基因，将其克隆人T载体中进行测序和分析．并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达。结果该基因全长1650bp，编码549个氨基酸。其中前24个氨基酸构成信号肽序列。与GenBank中报道的RH株相比，有12个核苷酸有差异，导致7个氨基酸发生改变，两者核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99．2％和98．9％。转化重组质粒pETROP5的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下，可表达出相对分子质量为64800的重组蛋白，并且能与弓形虫抗体发生血清学反应，表达量占菌体蛋白的15．6％。结论成功克隆和表达了弓形虫HT株ROP5蛋白基因，表达的重组蛋白具有良好的反应原性。