Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用

编号 zgly0000807204

文献类型 期刊论文

文献题名 Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用

作者 孙懿  周静  林戈  卢光琇 

作者单位 中南大学湘雅医学院生殖与干细胞工程研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(6)

页码 13-18

年份 2012 

分类号 Q254 Q813.11 

关键词 干细胞工程学  人胚胎干细胞  限定性内胚层  Activin  A 

文摘内容 【目的】:研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】:在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,96,120h的细胞,用实时荧光定量RT-PCR检测原条标记Gsc和Mixl1、中内胚层共同前体标记Brachyury、内胚层标记Foxa2和Sox17、中胚层标记Flk1、外胚层基因Pax6、多能性相关基因Oct4与Nanog表达水平的变化,用细胞免疫荧光检测Brachyury和Sox17蛋白表达水平的变化。【结果】:在人饲养层(HEF)培养体系上,高浓度Activin A能更快地促进中内胚层基因的表达并提高其表达水平;Brachyury和Sox17蛋白的细胞免疫荧光检测表明,Activin A诱导12和48h就可检测二者的表达明显增加,且二者的表达水平分别在诱导48和96h时达到高峰;hESCs高效分化为限定性内胚层细胞,DE细胞分化率为(81.7±5.4)%,并且体外的内胚层分化过程遵循从原条开始、经过中内胚层共同前体阶段、再到内胚层的发育过程,与体内发育规律相似。【结论】:Activin A能特异性地诱导人胚胎干细胞向限定性内胚层分化,转录调控Brachyury和Sox17蛋白的表达。