紫花苜蓿MsZAT10基因的克隆及其在烟草中的功能验证

编号 zgly0001691805

文献类型 期刊论文

文献题名 紫花苜蓿MsZAT10基因的克隆及其在烟草中的功能验证

作者 孙亚男  林茹  潘晓阳  陈月  陶磊  郭长虹 

作者单位 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江省分子细胞与遗传育种重点实验室 

母体文献 草业学报 

年卷期 2019年12期

年份 2019 

分类号 S541.9  S572 

关键词 紫花苜蓿  MsZAT10基因  低温胁迫  盐胁迫  功能 

文摘内容 C2H2型锌指蛋白ZAT10在植物应对外界非生物胁迫中具有重要的作用。克隆得到紫花苜蓿C2H2型锌指蛋白MsZAT10基因。该基因开放阅读框全长762 bp,编码253个氨基酸。ZAT10蛋白含有2个单C2H2型保守结构域,有典型的QALGGH保守基序,属于C2H2型锌指蛋白。氨基酸序列比对和进化树分析表明,紫花苜蓿MsZAT10与蒺藜苜蓿MtZAT10亲缘关系最近,其氨基酸的相似性为76%。构建植物表达载体pCBM-MsZAT10,通过农杆菌介导法转化到烟草,经过草丁膦（PPT）抗性筛选和聚合酶链式反应（PCR）鉴定,获得25株阳性植株。荧光定量PCR（qRT-PCR）检测表明,MsZAT10基因在转基因株系中得到表达。选取3个转基因株系进行抗逆性分析,在-4℃条件下处理2 h,转MsZAT10基因烟草叶片的萎蔫程度和相对电导率均低于野生型烟草。在0℃条件下处理5 h,转MsZAT10基因烟草与野生型烟草相比积累更多的脯氨酸和可溶性蛋白,但丙二醛（MDA）含量要低于野生型烟草。另外,在300 mmol·L-1 NaCl溶液中处理4 d,转MsZAT10基因烟草的打孔叶圆片仍保持绿色而野生型烟草明显失绿。以上结果表明MsZAT10基因在提高烟草对低温和盐胁迫的抗性方面具有重要的作用。