方正银鲫微卫星序列的筛选及PCR扩增产物的初步检测

编号 zgly0000473894

文献类型 期刊论文

文献题名 方正银鲫微卫星序列的筛选及PCR扩增产物的初步检测

作者 贾智英  梁利群  孙效文 

作者单位 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所农业部北方鱼类生物工程育种重点开放实验室  上海水产大学生命科学与技术学院 

母体文献 中国水产科学 

年卷期 2006,13(6)

页码 990-994

年份 2006 

分类号 Q959.46 

关键词 雌核发育  银鲫  微卫星DNA 

文摘内容 采用小片段克隆法构建了方正银鲫[(Carassius auratus gibelio(Block)]部分基因组文库, 并采用非影印的方法将转化子转移到硝酸纤维素滤膜上。用人工合成、并经放射性同位素[γ-^32P]ATP标记的(CA)15探针对构建的基因组文库进行筛选, 获得137个阳性克隆, 经测序得到微卫星序列130个, 其中完美型、非完美型、混合型分别占64.3%、16.9%和18.8%。应用引物设计软件Primer Prmmer5.0进行引物设计, 得到引物103对。合成30对引物, 随机选取其中5对进行PCR扩增。结果表明, 这5对引物均可以稳定扩增, 并且观测杂合度均较高。