暗黑鳃金龟气味结合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

编号 zgly0001528286

文献类型 期刊论文

文献题名 暗黑鳃金龟气味结合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

作者 房迟琴  张鑫鑫  刘丹丹  李克斌  张帅  曹雅忠  樊东  尹姣 

作者单位 东北农业大学农学院  中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 S433 

关键词 暗黑鳃金龟  气味结合蛋白  组织表达  蛋白纯化  荧光竞争结合实验 

文摘内容 【目的】暗黑鳃金龟Holotrichia parallela通过气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)识别性信息素和植物挥发物准确而迅速地定位配偶、寄主植物。本研究通过克隆暗黑鳃金龟气味结合蛋白15a(Hpar OBP15a)基因,解析该基因的编码蛋白特征、组织表达模式及与寄主植物气味等化合物的结合特性方面的研究,为阐明暗黑鳃金龟基于嗅觉识别的寄主植物选择机理奠定理论基础。【方法】根据暗黑鳃金龟成虫触角转录组测序的结果,利用RT-PCR克隆了Hpar OBP15a基因;Real-time PCR方法分析了该基因在成虫不同部位的表达量差异;荧光竞争结合测定了Hpar OBP15a蛋白和58种候选化合物的结合特征。【结果】暗黑鳃金龟Hpar OBP15a基因全长534 bp,编码147个氨基酸,Gen Bank登录号为AK1834747。Hpar OBP15a在触角中特异表达,且在雌虫触角中表达量显著高于雄虫。在被测的58种化合物中,Hpar OBP15a与46种气味化合物具有较好的亲和性,其中与十二烷、十二醇结合能力最强,其解离常数分别为8.5和11.3μmol/L;同时,对性信息素(L-异亮氨酸甲酯和R-芳樟醇)也有一定的结合能力(解离常数分别为21.0和18.5μmol/L)。【结论】Hpar OBP15a具有广泛的气味结合谱,其中对榆树挥发物十二烷的结合能力最强,因此该蛋白可能在暗黑鳃金龟对榆树的定位过程中具有重要作用。