hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究

编号 zgly0000562675

文献类型 期刊论文

文献题名 hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究

作者 孙淑娜  桂永浩  宋后燕  蒋缪  王跃祥 

作者单位 复旦大学附属儿科医院心内科  复旦大学分子医学教育部重点实验室 

母体文献 复旦学报：医学版 

年卷期 2008,35(3)

页码 325-329

年份 2008 

分类号 Q959.483 

关键词 hand2  斑马鱼  胚胎发育  吗啡啉修饰的反义核苷酸 

文摘内容 目的观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况，验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸(Morpholino oligonucleotides，MO)使hand2表达下调的有效性。观察hand2表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型，初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用，为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。方法采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2表达下调，并进行hand2表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为4组进行显微注射，即对照MO(ConM0)注射组、hand2MO注射组、hand2—GFPmRNA注射组和hand2—GFPmRNA＋hand2MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFPmRNA注射组和hand2—GFPmRNA＋hand2MO注射组的荧光表达情况以验证hand2表达下调的效率。在显微镜下观察hand2MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。结果hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2—GFPmRNA注射组在8hpf(hours post fertilization)时胚胎有较强的荧光表达，而hand2-GFPmRNA＋hand2 MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与ConMO注射组相比，hand2MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。结论向斑马鱼受精卵显微注射hand2MO的方法可有效的使hand2表达下调。hand2在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。