豇豆疫霉LAMP检测方法的建立

编号 zgly0001638790

文献类型 期刊论文

文献题名 豇豆疫霉LAMP检测方法的建立

作者 李本金  刘小丽  刘裴清  王荣波  翁启勇  陈庆河 

作者单位 福建省农业科学院植物保护研究所福建省作物有害生物监测与治理重点实验室  福建农林大学闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室 

母体文献 植物保护 

年卷期 2018年04期

年份 2018 

分类号 S436.43 

关键词 豇豆疫霉  内转录间隔区(ITS)  环介导等温扩增技术(LAMP)  分子检测 

文摘内容 本研究以豇豆疫霉Phytophthora vignae Purss核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列为靶标片段,设计4条特异性引物,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法。特异性检测结果表明:8株不同地理来源的豇豆疫霉菌株LAMP检测均为阳性(绿色),扩增产物用2.0%琼脂糖凝胶电泳出现特有的梯形条带,而其他11种卵菌近缘种及12种常见病原真菌和细菌共42个菌株均未观察到这些现象。灵敏度分析显示:该方法检测灵敏度在DNA水平上可达到100fg/25μL。采用LAMP方法对福建建瓯和宁德采集的62份疑似豇豆疫病病株样本进行检测,并用组织分离方法进行验证。结果表明,LAMP和组织分离方法的检出率分别为67.7%(42/62)和61.3%(38/62)。综合以上结果,LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简单的特点,适合基层部门用于田间豇豆疫霉快速检测。