防止PCR检测动物疫病反应体系污染措施

编号 zgly0001251467

文献类型 期刊论文

文献题名 防止PCR检测动物疫病反应体系污染措施

作者 李春晖 

作者单位 大连市动物卫生监督检验所 116013 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2002年03期

年份 2002 

分类号 S851.34 

关键词 动物疫病  PCR检测  污染措施  反应体系  假阳性结果  样品制备  动物卫生监督检验所  结果分析  分子生物学技术  操作区域 

文摘内容 ＰＣＲ技术是利用ＤＮＡ聚合酶，在体外大量合成（扩增）ＤＮＡ片段的分子生物学技术。具有特异性好、灵敏度高、简便快速等特点。即使在１０万个细胞中含有一个拷贝的待检核苷酸序列，也可用ＰＣＲ技术检测出来。伴随着高敏感性就产生了一个问题，即在不含目的基因的样品中有微小的污染——几个目的基因的片段，就会由于ＰＣＲ的扩增作用产生假阳性结果。所以防止反应体系的污染就成为ＰＣＲ技术检测动物疫病成败的关键。本文依据实际操作体会，采取以下有效措施，防止了交叉污染，减少了假阳性结果的出现。１ 制定动物疫病ＰＣＲ检测技术操作规范，严格依照规范操作 规范的内容包括如何采集和保存样品、制备样品、扩增操作及ＰＣＲ产物检测等内