编号 zgly0001527074
文献类型 期刊论文
文献题名 山羊毛囊外根鞘细胞系的建立
作者单位 山东科技职业学院 山东农业大学动物科技学院
母体文献 动物营养学报
年卷期 2016年10期
年份 2016
分类号 S827
关键词 毛囊外根鞘细胞 细胞系 济宁青山羊 生长特性 染色体数目
文摘内容 本试验旨在建立纯一、稳定的山羊毛囊外根鞘细胞系。活体采集济宁青山羊羔羊背部皮肤,采用机械分离与酶消化相结合的方法,分离外根鞘细胞,培养于含有表皮生长因子(EGF)、类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和氢化可的松的无血清角质细胞培养液中,置5%CO2浓度的37℃培养箱中启动原代培养。待原代细胞长成良好的单层后即可进行传代培养,细胞经传代培养至第8~10代时,更换含EGF、IGF-Ⅰ、氢化可的松和FBS的DMEM/F12培养液进行长期培养。选取传至第40代的外根鞘细胞进行生长特性研究与染色体分析。结果表明:体外培养的细胞倍增时间为51.9 h,培养细胞的染色体数仍以2n=60为主,但是出现了非整倍体性染色体特征;免疫细胞化学鉴定结果表明,该细胞系角蛋白19表达呈阳性。结果提示,本试验分离培养的细胞确为由山羊毛囊干细胞分化来的外根鞘细胞,体外培养的山羊毛囊外根鞘细胞系得到了成功建立。