口蹄疫病毒VP1基因在胡萝卜中的表达

编号 zgly0000506657

文献类型 期刊论文

文献题名 口蹄疫病毒VP1基因在胡萝卜中的表达

作者 张娅  曾君祉  陈耀锋  黄华樑 

作者单位 西北农林科技大学农学院  中国科学院遗传与发育学研究所  安波特基因工程技术有限公司 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2007,35(3)

页码 75-80

年份 2007 

分类号 Q786 

关键词 转基因胡萝卜  口服疫苗  口蹄疫病毒VP1基因 

文摘内容 为了生产一种可以直接口服的口蹄疫疫苗, 以胡萝卜(Daucus carota L.var.sativa)无菌幼苗下胚轴诱导的愈伤组织为受体材料, 通过农杆菌LBA4404介导的遗传转化, 在CaMV双35S启动子的驱动下, 将口蹄疫病毒(foot-and-mouthd iseasevirus, FMDV)结构蛋白VP1基因的活性肽片段(包括2个141～160位肽和1个200-213位肽的基因片段)导入胡萝卜愈伤组织细胞。经PCR和PCR-Southern杂交等方法鉴定转化苗, 确认口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因已整合到胡萝卜染色体中, 转化效率达到52%。SDS-PAGE试验结果初步证明, 在转化苗总蛋白中有目的基因表达, 胡萝卜种子中可溶性蛋白含量最高, 达3.57g/L, 而根中可溶性蛋白含量最低, 仅有0.17g/L; 靠近心叶的叶片可溶性蛋白含量可达到1.475g/L, 而最外部叶片可溶性蛋白含量仅有0.37g/L, 相差近5倍。Dot-ELISA和ELISA检测结果表明, 转化苗中表达的口蹄疫病毒结构蛋白VP1可以与FMDV灭活疫苗免疫动物制备的抗体特异结合。以上试验结果证明, 口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在转基因胡萝卜中表达成功。