非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定

编号 zgly0001690758

文献类型 期刊论文

文献题名 非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定

作者 官丽娟  邵钰  任伟杰  宫枫举  韩同福  邹艳丽  孙学强  吴晓东  张志  黄保续 

作者单位 青岛立见诊断技术发展中心  中国动物卫生与流行病学中心 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2019年12期

年份 2019 

分类号 S852.651 

关键词 非洲猪瘟病毒  结构蛋白  p54蛋白  表达 

文摘内容 p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。