柞蚕核型多角体病毒PCR检测方法的建立

编号 zgly0001422232

文献类型 期刊论文

文献题名 柞蚕核型多角体病毒PCR检测方法的建立

作者 贾平骜  姜义仁  任淑文  王勇  钟亮  杨瑞生  秦利 

作者单位 沈阳农业大学生物科学技术学院  辽宁省昆虫资源工程技术研究中心  黑龙江省蚕业研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S885.1 

关键词 柞蚕核型多角体病毒  ORF142基因  PCR  早期检测  幼虫血淋巴 

文摘内容 为了建立柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pernyi nucleopolyhedrovirus,ApNPV)的早期检测技术,采用NCBI提供的BLAST软件在线检索ApNPV特异基因ORF142的序列后设计引物AP1,对ApNPV基因组DNA进行PCR扩增,得到约130 bp的片段,最低检测量为0.5 fg/mL病毒DNA。分别以感染ApNPV的柞蚕幼虫总DNA和ApNPV多角体悬液为模板,相同扩增条件下可扩增出大小一致的一条特异性片段,最低检测量分别为1 fg/mL幼虫总DNA和20～25 PIBs/mL ApNPV多角体。以柞蚕4龄幼虫为材料,人工模拟感染ApNPV后取幼虫血淋巴为检测物可以直接检出ApNPV,当添毒量为2.3×108PIBs/mL时,添毒36 h后即可检出,且病毒感染后的检出时间与添毒浓度呈正相关。采用该方法的检测过程只需3 h,快速而方便。