山羊表皮干细胞的分离培养及EGFP基因转染研究

编号 zgly0001308214

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊表皮干细胞的分离培养及EGFP基因转染研究

作者 刘大勇  杨学义  窦忠英 

作者单位 西北农林科技大学陕西省国家干细胞工程技术研究中心  西北农林科技大学陕西省国家干细胞工程技术研究中心 陕西杨凌712100  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2006年08期

年份 2006 

分类号 Q813.11  Q78 

关键词 绿色荧光蛋白  山羊  表皮干细胞  转染 

文摘内容 采用组织块法和酶消化法对山羊表皮干细胞进行分离,对分离的表皮干细胞进行了免疫组化染色鉴定,并对其进行了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染研究。结果表明,2种方法均能得到山羊表皮干细胞,其中组织块培养法简单易行,组织块可重复利用,但原代细胞脱出时间较长,平均为8 d,且培养季节对细胞脱出时间、原代传代时间、传代数有显著影响;酶消化法周期短,8 d左右即可传代,不同培养季节对细胞克隆形成时间、细胞传代时间和传代数无显著影响,但处理过程繁琐。EGFP基因在转染表皮干细胞24 h后大量表达,转染率达20%~30%,72 h时转染强度最大,荧光可持续5周;转染使细胞增殖能力明显下降。