日本血吸虫新基因SjPP的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果

编号 zgly0000472547

文献类型 期刊论文

文献题名 日本血吸虫新基因SjPP的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果

作者 姚利晓  林矫矫  傅志强  朱传刚  李浩  陆珂  刘金明  石耀军  沈阳  蔡幼民 

作者单位 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心 

母体文献 中国农业科学 

年卷期 2006,39(8)

页码 1659-1666

年份 2006 

分类号 S852.735  Q95-331 

关键词 日本血吸虫  东方田鼠  丝/苏氨酸蛋白磷酸酶  核酸疫苗  免疫保护 

文摘内容 【目的】筛选克隆东方田鼠血清识别的日本血吸虫靶抗原基因, 并研究其免疫保护效果。【方法】利用东方田鼠感染血清免疫筛选日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA表达文库获得阳性克隆, 以5’RACE技术扩增获基因全长序列, 构建含目的基因的核酸疫苗并研究在小鼠中的免疫保护效果。【结果】(1)获得4个日本血吸虫新的EST序列, 即埘, p1(GenBank登录号BE974942)、mfs-3(GenBank登录号BE974944)、mfs-4(GenBank登录号BE974945)和mfs-5(GenBank登录号BE974946)。(2)mfs-5进行全长序列克隆, 获得的日本血吸虫新基因驴(GenBank登录号AY902477)长1311bp, 编码302个氨基酸, 理论分子量为34.7kD, 等电点为5.51; 其氨基酸序列具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(serine/threonine specific protein phosphatase, 简称PP)的保守序列LRGNHE, 并且含有该酶特异性抑制剂冈田酸的作用位点SAPNYC, 与人的PP6、鼠PP6、果蝇PPV等蛋白的氨基酸序列具有高度同源性, 分别达72%、70%和70%。(3)成功构建核酸疫苗pCMV—Script/船免疫BALB/c小鼠诱导产生肝组织减卵率为23.91%, 粪便减卵率为31.91%。【结论】(1)获得日本血吸虫新的抗原基因卿(2)含聊基因的核酸疫苗在小鼠中诱导了部分免疫保护效果。