双峰驼CYP2D6酶体外孵育体系的建立与优化

编号 zgly0001516838

文献类型 期刊论文

文献题名 双峰驼CYP2D6酶体外孵育体系的建立与优化

作者 王艳  高飞  哈斯苏荣 

作者单位 内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室  内蒙古骆驼研究院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S824 

关键词 双峰驼  CYP2D6酶  肝微粒体孵育体系  氢溴酸右美沙芬 

文摘内容 为了研究双峰驼CYP2D6酶体外活性,建立双峰驼肝微粒体孵育体系并对孵育体系中探针底物浓度、肝微粒体蛋白浓度和孵育时间等进行优化研究。首先采用改良差速离心法制备双峰驼肝微粒体、BCA法测定双峰驼肝微粒体蛋白浓度、CO还原差示光谱法检测CYP总酶含量,然后采用HPLC法跟踪检测孵育体系中CYP2D6酶特异性底物的主要代谢产物去甲右美沙芬含量进而优化孵育条件。结果表明,双峰驼肝微粒体蛋白浓度为5.565 0mg/mL±0.519 7mg/mL,CYP总酶含量为0.177 7nmol/mg±0.050 3nmol/mg;肝微粒体孵育体系的最适底物浓度为250μg/mL,肝微粒体蛋白浓度为5.565 0mg/mL,最适孵育时间为40min。所制备的双峰驼肝微粒体各项指标和优化后的肝微粒体孵育条件均能满足后续对双峰驼CYP2D6酶体外活性研究的基本要求。