甘肃金鳟AFLP体系建立及应用

编号 zgly0000706020

文献类型 期刊论文

文献题名 甘肃金鳟AFLP体系建立及应用

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 苏军虎  张艳萍  娄忠玉  焦文龙  王太  杨建宝  吴建平  魏彦明 

作者单位 甘肃农业大学生命科学技术学院  甘肃省水产科学研究所甘肃省冷水性鱼类种质资源与遗传育种重点实验室 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2011,27(7)

页码 400-404

年份 2011 

分类号 Q953 

关键词 扩增片段长度多态性  甘肃金鳟  体系构建  优化 

文摘内容 甘肃金鳟是中国自主培育的虹鳟新品种,为进行其种质资源研究和遗传管理,以其尾鳍为试验材料,提取基因组DNA,对影响甘肃金鳟扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,包括模板DNA浓度、基因组酶切时间、选择性扩增中Mg2+、预扩增产物稀释倍数及选扩性引物M+3/E+3配比等进行比较分析,建立了适于甘肃金鳟的AFLP反应体系。即: 100ng基因组DNA,3U EcoR I37℃酶切3h,再Mse I65℃酶切5h;然后用1U的T4连接酶连接12h,选扩25μL PCR反应体系中Mg2+2.0mmol/L,预扩产物稀释30倍,选扩引物M+3/E+3配比为8∶1,所得产物经电泳和银染后可获得清晰条带,效果良好;最后,筛选出了适宜甘肃金鳟品种分析的13对选择性引物。