添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响

编号 zgly0001229691

文献类型 期刊论文

文献题名 添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响

作者 安立龙  高志敏  杨奇  冯秀亮  窦忠英  雷安民  杨春荣  邱怀 

作者单位 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室  西北农林科? 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2001年05期

年份 2001 

分类号 S814.8 

关键词 牛  小鼠  胚胎干细胞  内细胞团  克隆效率 

文摘内容       研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆 ;在 ES细胞培养液中 ,犊牛血清体积分数以 15 %～ 2 0 %为宜 ,在 DMEM(L )培养液中添加 0 .1μm ol/ L Na2 Se O3+0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 +10 ng/ m L IGF+10 0 0 ng/ m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;低糖 DMEM比TCM199和高糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离。优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在37℃用低体积分数消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高