华北落叶松胚性组织超低温保存技术研究

编号 zgly0001737249

文献类型 期刊论文

文献题名 华北落叶松胚性组织超低温保存技术研究

作者 陈晓艺  江帅菲  代剑峰  袁德水  Lisheng Kong  张金凤  赵健 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  林木分子设计育种高精尖创新中心  河北省林业科学研究院  河北省木兰围场国有林场管理局 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2021,43(10)

页码 47-53

年份 2021 

分类号 S791.22  S722.17 

关键词 华北落叶松  超低温保存  胚性愈伤组织  梯度预处理 

文摘内容 【目的】超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法。本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响,以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能。【方法】本研究以华北落叶松胚性组织为材料,对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处理方式、解冻方式和恢复培养等关键环节开展研究。预培养和冷冻保护共设计成4种处理,以不经过预培养和冷冻保护直接冷冻保存为对照,每个处理重复3次。【结果】结果表明:处理组合1、2、3之间虽无显著差异,但结合冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)对细胞具有一定毒害作用,高浓度的DMSO会影响后续胚性组织的恢复甚至造成细胞死亡,因此选出效果较好的超低温保存方法为:0.2、0.4 mol/L山梨醇液体梯度预处理与0.4 mol/L山梨醇+5%DMSO为冷冻保护剂进行冷冻保护,最佳解冻方式为37℃水浴,解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达78%;超低温保存后的胚性组织与正常增殖的胚性组织在外观及显微结构上无明显差异,且低温保存后的愈伤组织仍保持分化形成体细胞胚的能力。【结论】研究结果为华北落叶松乃至其他针叶树胚性组织的超低温保存提供了参考。