利用gusA基因在水稻组织中示踪和定量水稻白叶枯病菌的方法

编号 zgly0001674420

文献类型 期刊论文

文献题名 利用gusA基因在水稻组织中示踪和定量水稻白叶枯病菌的方法

作者 李瑜  李逸朗  张翠萍  陈涛  罗铃滈  李映斌  陈功友  罗坤  邹丽芳 

作者单位 湖南农业大学植物保护学院  上海交通大学农业与生物学院 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 S435.111.47 

关键词 水稻白叶枯病菌  病程  gusA基因  GUS活性 

文摘内容 水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo）从自然孔口水孔或者伤口处侵入水稻叶片,在维管束中定殖、繁殖和扩展,引起典型的叶枯症状。可视化这个动态的病程过程和快速定量水稻组织中细菌的群体是Xoo-水稻互作研究中亟待突破的技术难点。本研究在PXO99A菌株中表达gusA基因,将其置于lacZ启动子、hrpX启动子和不含有（T1）4终止子的hrpX启动子下,构建了3个示踪菌株PXO99A AGUSRBS、PXO99GUSA X和PXO99GUSX-。水稻上毒性测定结果显示,这3个示踪菌株与野生型PXO99A展现相同的毒性。利用示踪菌株,通过注射接种法,能够观察到Xoo在水稻维管束中定殖和扩展的动态变化;通过喷雾接种法,能够观察到Xoo从叶尖或者叶缘侵入水稻叶片引起发病的特性;发现PXO99GUSA X和PXO99A AGUSX-比PXO99GUSA RBS能够更加灵敏地反映这些病程。同时发现,PXO99GUSARBS的细菌数量与受其侵染的水稻组织的GUS活性显著正相关。本研究也评价了利用GUS活性测定法精确和快速地定量水稻组织中细菌群体的可行性。以上结果表明这套GUS系统是非常有效的,能够示踪病原菌的侵染过程和监测细菌在水稻组织中的群体数量,这将为Xoo-水稻互作研究提供有力的技术支持。