阔叶猕猴桃抗生素敏感性及遗传转化的研究

编号 zgly0000477066

文献类型 期刊论文

文献题名 阔叶猕猴桃抗生素敏感性及遗传转化的研究

作者 毕静华  高月  刘永立  叶庆富 

作者单位 浙江大学园艺系  浙江大学原子核农业科学研究所 

母体文献 核农学报 

年卷期 2006,20(4)

页码 287-291,302

年份 2006 

分类号 S945.12  Q943.2 

关键词 阔叶猕猴桃  根癌农杆菌  抗生素  Gus  叶片  再生 

文摘内容 以阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia)叶片为外植体, 研究了各种抗生素对形态分化和器官形成的影响, 并以叶盘为受体, 通过根癌农杆菌介导法获得了抗性愈伤组织和抗性芽, 组织化学染色表明gus基因已在植物组织中表达。研究结果表明, 对不定芽分化来说, 头孢霉素(Cef)效果明显好于羧苄青霉素(Carb)。Cef浓度为300mg·L^-1时效果最好, 再生频率达100%, 平均再生芽数达最大为9.76个芽/外植体。生根过程中高浓度的Cef(≥200mg·L^-1)明显抑制生根, 而Carb对生根没有显著影响。在卡那霉素(Kan)和Carla组合处理中, Carla对生根没有显著影响, 但Kan明显抑制生根。随着Karl浓度的升高, 生根率和平均根数迅速减少, 当浓度升高到50mg·L^-1时, 生根完全被抑制。因此, 农杆菌介导的阔叶猕猴桃遗传转化中愈伤组织和不定芽诱导过程宜选用300mg·L^-1Cef来抑制农杆菌生长, Kan筛选的临界浓度为20mg·L^-1。在抗性芽生根过程中Kan浓度应该控制在50mg·L^-1以内, 并改用Carb作为杀菌剂, 生根效果会更好。该研究确定了农杆菌介导的阔叶猕猴桃叶片遗传转化中使用抗生素的种类和用量, 为通过基因工程对阔叶猕猴桃进行遗传改良奠定了基础。