编号 zgly0001298816
文献类型 期刊论文
文献题名 美洲大蠊主要变应原蛋白的质谱鉴定与分析
作者单位 深圳大学生命科学学院微生物基因工程重点实验室 江西医学院基础医学部 广东省疾病预防控制中心昆虫研究所 广东省疾病预防控制中心昆虫研究所 广东深圳518060江西医学院基础医学部 南昌330006 广东深圳518060 广州510300 广州510300
母体文献 昆虫学报
年卷期 2005年02期
年份 2005
分类号 Q965
关键词 美洲大蠊 液相色谱 电喷雾 串联质谱 变应原 鉴定
文摘内容 为了建立美洲大蠊 Periplaneta americana变应原蛋白的质谱鉴定方法, 我们将美洲大蠊粗浸液通过 DEAE-52 离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等分离步骤得到纯化的74 kD蛋白, 对纯化前后的该74 kD蛋白分别进行SDS-PAGE及凝胶内胰酶酶切, 再经液相色谱-电喷雾-串联质谱 (HPLC-ESI-MS-MS) 在线联机分析, 所得质谱数据进入网站 (http: www.matrixscience. com) 进行Mascot检索比对。通过对两者质谱鉴定结果的比较来评估美洲大蠊天然主要变应原蛋白的纯化效果。结果表明, 纯化蛋白经HPLC-ESI-MS-MS鉴定是美洲大蠊主要变应原蛋白; 离子交换层析等纯化步骤可以去除同一分子量的杂蛋白 (如卵黄原蛋白), 从而获得较好的鉴定结果。我们首次成功地运用质谱建立起变应原蛋白的新鉴定方法。