关中奶山羊BAC文库构建条件研究

编号 zgly0001276222

文献类型 期刊论文

文献题名 关中奶山羊BAC文库构建条件研究

作者 贾玉艳  陈宏  邓继先 

作者单位 军事医学科学院生物工程研究所  西北农林科技大学动物科技学院  军事医学科学院生物工程研究所 北京100071西北农林科技大学动物科技学院  陕西杨凌712100  陕西杨凌712100徐州师范大学生物技术研究所  江苏徐州221116  北京100071 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2004年06期

年份 2004 

分类号 S827.94  Q785 

关键词 细菌人工染色体(BAC)  基因组文库  奶山羊 

文摘内容 BAC(bacterialartificialchromosome,细菌人工染色体)是一种新发展起来的构建高等生物基因组文库的重要方法。由于关中奶山羊产奶性能好,成为制备乳腺生物反应器的理想动物之一,故对关中奶山羊BAC文库的构建条件进行了研究。用BamH 部分酶切关中奶山羊的基因组,用CHEF(箝位匀强电场)凝胶电泳分离大片段DNA,以电透析法回收DNA后,与酶切脱磷的pBeloBAC11载体连接,然后电激转化感受态细胞DH10β,得到了数千个阳性克隆,插入片段平均为30～40kb。在此过程中摸索了BAC载体制备、高分子量DNA制备、酶切、连接和电激转化等一系列环节对高效转化产生大片段DNA克隆的影响。