富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化

编号 zgly0000614730

文献类型 期刊论文

文献题名 富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化

作者 冯志国  陆婕  郎君  李燕娇  陈正望 

作者单位 华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室  信阳师范学院生命科学学院 

母体文献 生物技术通报 

年卷期 2009(3)

页码 88-90

年份 2009 

分类号 Q78  S888.31 

关键词 果蝇  富甘氨酸抗菌肽  直接表达  纯化  葡萄糖效应 

文摘内容 利用RT—PCR技术从果蝇总RNA中克隆出富甘氨酸果蝇抗菌肽基因，将该基因插入原核表达载体pET-32a（＋）的Nde I和Xho I酶切位点之间，然后用重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）利用乳糖操纵子的葡萄糖效应IPTG诱导表达，经15％SDS—PAGE、Western blot分析，在大约8kD处出现了含6×His标签的抗菌肽蛋白。再以Ni—N TA纯化树脂进行亲和层析、脱盐、冻干，成功制备了富甘氨酸果蝇抗菌肽蛋白。