转基因741杨原生质体游离与纯化研究

编号 zgly0001414693

文献类型 期刊论文

文献题名 转基因741杨原生质体游离与纯化研究

作者 张旭  王桂英  朱建锋  郑克举  王进茂 

作者单位 河北农业大学林学院  廊坊市农林科学院  河北省林木种质资源与森林保护重点实验室 

母体文献 河北林果研究 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S792.11 

关键词 转双抗虫基因741杨  原生质体  游离  纯化 

文摘内容 以转双抗虫基因741杨无菌苗叶片为材料,对叶片原生质体游离、纯化方法及影响因素等进行了分析研究。结果表明,上部叶片产量和活力均高于其他叶位,在实验的浓度范围之内,Macerozyme R-10(离析酶)、Cellulase Onozuka R-10(纤维素酶)、Driselase(Sigma)(崩溃酶)对原生质体的产量和活力无显著影响。适宜转双抗虫基因741杨叶片原生质体游离与纯化的条件为无菌苗上部叶片为材料,0.7mol/L甘露醇的CPW盐溶液预质壁分离1～1.5hCPW+0.5%Macerozyme R-10+0.25%CellulaseOnozuka R-10+0.025%Driselase(Sigma)+0.5mol/L甘露醇(pH 5.7),酶解温度27℃,酶解时间10h,用过滤-离心-漂浮法纯化原生质体。