乙烯利诱导橡胶树胶乳cDNA消减文库的构建

编号 zgly0000539359

文献类型 期刊论文

文献题名 乙烯利诱导橡胶树胶乳cDNA消减文库的构建

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 刘宽灿  杨云  赵丽红  张治礼 

作者单位 中国热带农业科学院热带生物技术研究所  热带作物生物技术国家重点实验室 

母体文献 热带作物学报 

年卷期 2007,28(3)

页码 1-4

年份 2007 

分类号 S794.104 

关键词 乙烯利  橡胶树  胶乳  SSH差减文库 

文摘内容 为解析乙烯利刺激巴西橡胶树橡胶增产的分子机制,应用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)成功构建了乙烯利刺激条件下橡胶树胶乳与未处理橡胶树胶乳差异表达的cDNA消减文库。经蓝、白斑筛选,共得到了118个阳性克隆。菌落PCR分析结果表明,92%左右的阳性克隆含有大小200～500bp的插入片段。随机选取25个克隆进行了测序,并用基因检索工具(Genbank)对获得的EST进行了Blastx分析,结果表明,5个EST属于无任何序列线索的未知序列,6个属于未知功能的推测蛋白基因,2个属于未知功能的蛋白基因,3个与已知功能基因具有较高的同源性。应用半定量PCR技术,对编号203片段进行的表达分析结果表明,该片段为乙烯利诱导特异表达基因,在乙烯利处理后24h范围内随处理时间的增加而表达量增强,叶片中没有检测到该基因的表达。