乙型脑炎病毒NS1’蛋白移码序列的鉴定

编号 zgly0001423446

文献类型 期刊论文

文献题名 乙型脑炎病毒NS1’蛋白移码序列的鉴定

作者 郑浩  童光志 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S852.659.6 

关键词 乙型脑炎病毒  核糖体移码  NS1’蛋白 

文摘内容 本文通过对猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中移码序列分析,设计合成三条引物,通过PCR扩增出假定的NS1’移码片段,并将移码片段三倍重复克隆入pET-28a表达载体中。重组质粒转化E.coli BL-21后,经IPTG诱导在37℃下实现目的片段的可溶性表达。纯化表达产物,并免疫小鼠制备了多抗血清,以多抗血清为一抗,对JEV感染的Vero细胞进行免疫荧光分析,结果发现抗移码片段表达蛋白的血清可识别JEV蛋白。以JEV感染Vero细胞,提取感染细胞总蛋白,分别以NS1单抗和以上制备的多抗血清为一抗,进行Western blot分析。结果显示,NS1单抗为一抗,可染出48 kDa的NS1条带和56 kDa的NS1’条带;而以多抗血清为一抗,仅染出56 kDa的条带。上述结果显示,多抗血清识别的NS1’蛋白为NS1’移码后片段表达的蛋白。