异源表达N-端融合eYFP标签的GAAPs增强拟南芥对ER胁迫敏感性

编号 zgly0001640023

文献类型 期刊论文

文献题名 异源表达N-端融合eYFP标签的GAAPs增强拟南芥对ER胁迫敏感性

作者 朱蔓莉  王智颖  唐小寒  郭坤  王薇  孙越  张伟  李小方 

作者单位 华东师范大学生命科学学院 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2018年06期

年份 2018 

分类号 Q945.78 

关键词 拟南芥  GAAPs  ER胁迫  细胞死亡  未折叠蛋白响应 

文摘内容 高尔基体抗凋亡蛋白GAAPs(Golgi anti-apoptotic proteins)在真核生物中高度保守,是动物细胞中抑制胁迫诱导凋亡的BAX inhibitor-1类因子。反向遗传学研究表明,拟南芥GAAPs也能够抑制ER胁迫诱导的细胞死亡。为进一步在蛋白质水平研究GAAPs的功能和作用机制,通常使用基因融合标签的表达转化植株,但要考虑所使用的标签是否影响蛋白的功能。为此,我们分别构建了GAAP1和GAAP4的N末端融合e YFP、无e YFP标签的拟南芥过量表达转化子。通过检测e YFP-GAAP1/GAAP4以及gaap1突变体对ER胁迫敏感性,发现e YFPGAAP1/GAAP4过量表达与gaap1突变体类似,ER胁迫下的存活率降低,细胞死亡增强。定量PCR分析表明e YFPGAAP1过量表达抑制急性或长期ER胁迫下未折叠蛋白响应(unfolded protein response,UPR)通路相关基因的表达。这些结果表明GAAPs的N-端融合e YFP标签影响其在ER胁迫抗性以及抗细胞死亡中的功能。