灵芝甾醇14α-脱甲基酶基因的克隆及超量表达对三萜合成的影响

编号 zgly0001411468

文献类型 期刊论文

文献题名 灵芝甾醇14α-脱甲基酶基因的克隆及超量表达对三萜合成的影响

作者 方星  师亮  徐颖洁  赵明文 

作者单位 南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室  南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2011年02期

年份 2011 

分类号 S567.31 

关键词 灵芝  Agrobacterium tumefaciens介导转化  超量表达  三萜合成 

文摘内容 灵芝Ganoderma lucidum是我国传统的药用真菌,三萜类物质是灵芝的主要生物活性成分,甾醇14α-脱甲基酶是三萜合成途径中的关键酶。根据已报道其他物种甾醇14α-脱甲基酶的氨基酸保守序列设计简并引物,获得灵芝甾醇14α-脱甲基酶特异基因片段,并进一步获得灵芝甾醇14α-脱甲基酶基因的全长DNA和cDNA序列。其中DNA序列长1,981bp,cDNA序列长1,635bp。结构基因编码蛋白包含544个氨基酸,分子量为61.99kDa,等电点为6.36。将甾醇14α-脱甲基酶基因的cDNA序列克隆到灵芝超量表达载体pGl-GPD中,利用农杆菌介导的转化法实现了甾醇14α-脱甲基酶基因在灵芝内的超量表达。转化子的甾醇14α-脱甲基酶基因在转录水平表达量增加,三萜含量增加。进一步研究发现,三萜合成途径的关键酶基因Gl-aact、Gl-hmgr及Gl-ls的转录表达量也有所增加。