家蚕蛹体基因组DNA的快速制备方法

编号 zgly0001221572

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕蛹体基因组DNA的快速制备方法

作者 赵巧玲  张志芳  何家禄 

作者单位 农业部家蚕生物技术重点开放实验室!中国农业科学院蚕业研究所  镇江212018 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2000年01期

年份 2000 

分类号 S881 

关键词 基因组DNA  家蚕蛹  快速制备方法  家蚕微粒子孢子  开放实验室  中国农业科学院  蚕业研究所  生物技术  蚕业科学  琼脂糖 

文摘内容 提取家蚕组织ＤＮＡ的方法已有不少报道 ,如夏庆友等[1] 参照文献 [2 ]改进的方法 ,其基本步骤是将家蚕组织在液氮中手工研磨或用玻璃匀浆器匀浆 ,加提取缓冲液和ＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ ,在 50～ 6 5℃水浴恒温振荡 3～ 6ｈ ,然后用酚、氯仿抽提数次 ,无水乙醇沉淀 ,75%乙醇洗涤后溶于适当体积的 0 1×ＴＥ缓冲液 ,加ＲＮＡ酶消解ＲＮＡ ,保存备用。该方法适于提取丝腺、卵的基因组ＤＮＡ。然而 ,家蚕蛹体由于脂肪、色素较多 ,且整体组织中含有大量的ＤＮＡ酶 ,按上述方法提取ＤＮＡ纯度不高 ,并容易降解。我们分析认为可能是提取液中的ＥＤＴＡ浓度太低 ,不足以抑制整体组织中的ＤＮ