拟南芥多聚腺苷酸化因子CFIm25植物表达载体的构建及亚细胞定位分析

编号 zgly0001634553

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥多聚腺苷酸化因子CFIm25植物表达载体的构建及亚细胞定位分析

作者 刘玲  赵淑清  李琴珍  马留银 

作者单位 山西大学生物技术研究所  福建农林大学林学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年08期

年份 2018 

分类号 Q943.2 

关键词 拟南芥  CFIm25  植物表达载体  瞬时转化  亚细胞定位 

文摘内容 CFIm25是前体m RNA多聚腺苷酸化的关键因子,在动物中研究较多,主要定位于细胞核和细胞质。而在植物中,目前的报道仅见于细胞核。为探究该因子在拟南芥中的功能及亚细胞定位,本研究首先对CFIm25做进化分析,结果显示,CFIm25的两个亚基亲缘性极高,说明二者功能相似,另外,它们与AT5G51660的亲缘关系也很近,暗示三者可能参与相同的生物学事件。接着我们克隆了拟南芥(Arabidopsis thaliana)CFIm25的两个基因At4g25550和At4g29820,构建植物表达载体pCAMBIA3301-ACT2-CFIm25并进行烟草(Nicotiana tabacum)转化。荧光显微镜观察发现,CFIm25在烟草下表皮细胞的细胞质和细胞核均有表达,进一步分析发现CFIm25主要定位在细胞质中。说明拟南芥CFIm25不仅存在于细胞核,也存在于细胞质中,提示该因子可能在细胞质中发挥一定的生物学功能。最后,采用农杆菌介导的花序浸泡法将重组质粒转化拟南芥,经Western blot检测证实At4g25550/At4g29820已成功整合到部分植株的基因组中。综上,本研究为进一步探索拟南芥CFIm25的功能提供了理论依据。