外源性人TIMP-1基因在转基因小鼠染色体上的整合及定位

编号 zgly0000447176

文献类型 期刊论文

文献题名 外源性人TIMP-1基因在转基因小鼠染色体上的整合及定位

作者 朱晗玉  陈香美  马润林  张冬芬  任建功 

作者单位 中国人民解放军总医院肾病中心暨重点实验室  中国科学院遗传与发育生物学研究所 

母体文献 中国生物化学与分子生物学报 

年卷期 2006,22(1)

页码 37-42

年份 2006 

分类号 Q254  Q26 

关键词 转基因动物模型  基质金属蛋白酶组织抑制物-1  荧光原位杂交  反向PCR 

文摘内容 为探讨外源基因人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1, hTIMP-1)基因在转基因小鼠家系染色体上的整合和精确定位, 应用Southern印迹检测外源基因在染色体上整合的位点及拷贝数, 结果表明, 外源基因是以单拷贝、单位点形式整合; 应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技术检测F4～F20代转基因小鼠中外源基因的整合。结果证明, 该家系转基因小鼠自F4代起是纯合子, 外源基因整合在17号染色体E区; 反向PCR法(Inverse PCR, IPCR)克隆出约3.8kb外源基因整合位点处的侧翼序列。分析表明, 外源基因整合在17号染色体E1.3区, ALK(anaplastic lymphoma kinase, ALK)基因第23个内含子区域、结果提示, 获得的转基因小鼠为纯系, 外源基因hTIMP-1已稳定整合在转基因小鼠染色体上, 并能遗传给后代。